利多卡因对发育期海马神经细胞生长的抑制作用及相关机制研究

摘要：

目的 研究利多卡因对发育期海马神经细胞生长的影响及相关分子机制.方法 通过做浓度依赖实验确定利多卡因实验浓度,依据不同浓度利多卡因分为3组,其中对照组给予0.9％生理盐水处理,不加利多卡因,A组加入1μM利多卡因,B组10μM利多卡因.采用四唑盐(MTT)法检测利多卡因对发育期海马神经细胞增殖能力的影响;采用PI单染法检测利多卡因对发育期海马神经细胞的细胞周期影响;采用Annexin V?FITC双染法检测利多卡因对发育期海马神经细胞凋亡水平的影响;采用RT?PCR实验检测mTOR、CyclinD1及Cleaved caspase3基因水平.采用Western blot法检测利多卡因对发育期海马神经细胞mTOR、CyclinD1、Cleaved caspase3蛋白表达的影响.结果 通过MTT实验发现利多卡因处理第2 d后A组及B组神经细胞增殖水平显著低于对照组(P<0.05);第2 d后B组神经细胞增殖水平显著低于A组(P<0.05).PI单染实验发现A组及B组的G0/G1期细胞比例显著高于对照组(P<0.05);A组及B组的S期细胞比例显著低于对照组(P<0.05);A组及B组的G2/M期细胞比例显著低于对照组(P<0.05).Annexin V?FITC双染实验发现A组及B组细胞凋亡率均显著高于对照组(P<0.05);B组细胞凋亡率显著高于A组(P<0.05).RT?PCR实验发现A组及B组的mTOR、CyclinD1基因水平均低于对照组(P<0.05);B组的mTOR、CyclinD1基因水平低于A组(P<0.05);A组及B组的Cleaved caspase3基因水平显著高于对照组(P<0.05);B组Cleaved caspase3基因水平显著高于A组(P<0.05).Western blot实验发现A组及B组mTOR、CyclinD1蛋白水平均低于对照组(P<0.05);B组的mTOR、CyclinD1低于A组(P<0.05);B组Cleaved caspase3蛋白水平显著高于A组(P<0.05).结论 利多卡因可抑制发育期海马神经细胞生长,并导致神经细胞发生凋亡,利多卡因的神经毒性可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关.

关键词：利多卡因、海马神经细胞、细胞周期

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资助基金：河南省教育厅科技攻关项目18B310010

在线出版日期：2019-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：176-181,188