直接快速多色荧光PCR技术在高危型HPV分型中的应用探讨

摘要：

目的 探讨直接快速多色荧光PCR技术在高危型人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染分型检测中的应用.方法 对2014年3月至2014年10月794例患者宫颈粘液样本,采用直接快速多色荧光PCR技术与传统荧光PCR技术同步进行HPV分型检测,并对比分析.对于检测试剂与对比试剂检测结果不一样的样本,采取测序法复核.选择中国生物制品检定研究院HPV标准品进行18种HPV型别最低检出量和特异性分析.同时测试直接快速多色荧光PCR技术在AB7500FAST、Bio-Rad CFX96、Roche480、AGS9600等多种荧光扩增仪上的扩增效果并进行比较.结果 794例样本中,检测试剂检出高危型HPV阳性患者600例,阴性样本194例.对比试剂检出HPV阳性患者595例,阴性样本199例.直接快速多色荧光PCR技术检测HPV的18个型别的最低检测量在100~1000 copies/mL之间;在AB7500FAST、Bio-Rad CFX96、Roche480、AGS9600等仪器的比对分析中,Bio-Rad CFX96检测结果表现最佳.Roche480反应时间最长,本底相对较高.国产安杰思AGS9600仪器检测与AB7500持平居中.结论 直接快速PCR技术无需核酸提取,样本直接进行快速PCR扩增,检测时间短,反应速度快,特异性高,重复性好,试剂本身带有颜色示踪,对于解决我国临床HPV检测的普及具有重要意义.

关键词：人乳头状瘤病毒、基因分型、直接快速多色荧光PCR、宫颈上皮内瘤变(CIN)

所属期刊栏目：9

分类号：U47;TV7

在线出版日期：2017-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：386-390