实时荧光定量PCR检测大鼠VEGF mRNA方法的建立及初步应用

摘要：

目的 建立大鼠血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)实时荧光定量PCR检测方法,对健康大鼠不同组织中VEGF mRNA水平进行检测分析.方法 跨内含子设计引物和TaqMan探针,扩增片段TA克隆人pGEM-T载体,制成标准品,分析其特异性、灵敏性和重复性;提取健康大鼠不同部位组织(肺、心、肝脏、肾脏、脑、胃、肠和颌下腺)总RNA,分析其VEGFmRNA表达水平.结果 测序及电泳条带证实PCR反应的特异性.批内CV为2.0%～6.7%,批间CV值为3.5%～10.6%,r>0.99;肺组织中VEGF mRNA表达最高,与其他任意组相比差异均具有统计学意义(P<0.05),其它各组织间差异无统计学意义.结论 本研究成功建立了检测大鼠VEGFmRNA的实时荧光定量PCR方法,具有高灵敏、高特异、高重复性的特点;健康大鼠不同部位组织中VEGFmRNA的表达水平分析为以后研究疾病大鼠模型表达水平奠定了基础.

关键词：实时荧光定量PCR、血管内皮生长因子、大鼠

所属期刊栏目：2

分类号：S85;R44

在线出版日期：2010-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：115-118