荧光素-曙红Y能量转移荧光猝灭法测定微量白蛋白研究

摘要：

在λex/λem=405/547 nm,于缓冲溶液和表面活性剂存在的情况下,荧光素和曙红Y能够发生有效能量转移,而牛血清白蛋白( BSA)的加入使得曙红Y荧光猝灭,该体系可用于微量蛋白质的测定.系统探讨了荧光素-曙红Y能量转移体系发生荧光猝灭的条件,最佳条件为:2.0 mL pH=3.8的B-R缓冲溶液,0.4 mL 0.05％曲拉通X100,1.5 mL1.0×10-4 mol/L的荧光素水溶液,2.0mL1.0×10-4 mol/L的曙红Y水溶液,最佳实验时间为溶液配制完成静置15 min后60 min内,最佳加入顺序为pH=3.8缓冲溶液+荧光素+曙红Y+曲拉通+蛋白质标准溶液或样品.在优化的实验条件下,蛋白质含量在0～2.0 μg/mL范围内与荧光猝灭强度呈良好的线性关系.检出限为6.6 ng/mL;测定样品的相对标准偏差(RSD)在±5％以内；样品加标回收率为90.4％～95.3％.该法可用于人血清、牛奶中蛋白质含量的测定.

关键词：蛋白质、荧光素、曙红Y、能量转移、荧光分析法

所属期刊栏目：28

分类号：O657.39(分析化学)

在线出版日期：2012-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：212-216