吸水链霉菌valG基因的克隆与表达

摘要：

为提高井冈霉素A的产量,本实验尝试构建吸水链霉菌的多拷贝基因菌株.根据吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus subsp.jinggangensis)的糖基转移酶基因(valG)序列设计了1对引物.PCR扩增编码糖基转移酶(ValG)的1269 bp基因后,利用TA克隆构建克隆质粒pMD-19-valG.测序正确后经双酶切构建穿梭质粒pIJ8630-valG.再次测序验证后,经质粒DNA转化吸水链霉菌感受态细胞将pIJ8630-valG导入吸水链霉菌中.PCR检测证实重组菌构建成功.HPLC检测发酵产物,发现井冈霉素A的产量达到了1.17 mg/mL,比出发菌株提高了11.2％,valG基因得到表达,为进一步利用valG构建新的高产菌株奠定了基础.

关键词：吸水链霉菌、井冈霉素A、穿梭质粒

所属期刊栏目：43

分类号：R91;R38

在线出版日期：2014-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1-5