10.11895/j.issn.0253-3820.160572
基于免疫磁分离的荧光微球免疫层析法检测猪霍乱沙门氏菌
建立了基于免疫磁分离的荧光微球免疫层析法,检测猪霍乱沙门氏菌.待检样品经免疫磁分离富集和热洗脱处理后,用荧光微球免疫层析试纸条进行检测.每毫克纳米磁珠标记30μg抗体制备的免疫磁珠,对浓度为102 ~ 106 CFU/mL的猪霍乱沙门氏菌的捕获率均大于90%,特异性好;在pH=6时,以300μ,g/mg猪霍乱沙门氏菌单抗11D8-D4标记荧光微球,制备免疫荧光微球;以2.0 mg/mL猪霍乱沙门氏菌单抗5F11-B11喷涂检测线(T线),以1.0 mg/mL驴抗鼠IgG喷涂质控线(C线),制备免疫层析试纸条.采用建立的基于免疫磁分离的荧光微球免疫层析方法检测猪霍乱沙门氏菌,在PBS缓冲液中检出限为1.5×105 CFU/mL,牛奶中检出限为7.6×105 CFU/mL,与直接采用荧光微球免疫层析方法检测相比,检出限分别降低了10倍和200倍.本方法可有效富集牛奶中的沙门氏菌,避免了基质干扰,灵敏度大大提高,具有较好的应用前景.
免疫磁分离、荧光微球、免疫层析、猪霍乱沙门氏菌
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TU9;R44
国家自然科学基金31271863;江西省教育厅落地项目KJLD13009;江西省生猪产业质量安全岗位专家项目No.JXARS-03资助 This work was supported by the Jiangxi Agriculture Reseach SystemJXARS-03;the JIangxi Education Bureau TechnologyKJLD13009
2017-05-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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