介孔氧化铁材料快速、高效富集分离磷酸化肽段和蛋白的新方法研究

摘要：

以0.1 μmol/L β-casein磷酸化蛋白酶解液为对象,利用在酸性条件下对PO3-4能够特异性吸附的氧化铁材料为新载体,对介孔氧化铁材料富集分离磷酸化肽段的孵育液酸含量、孵育液有机溶剂含量和洗脱液选择的条件进行了优化,结果表明:室温条件下,在含有0.1%乙酸和30%乙腈的孵育液中孵育5 min后,经1 mol/L NH3·H2O溶液的洗脱,介孔氧化铁可有效地将磷酸化肽段从蛋白酶解液中富集分离.本方法也可以选择性地提取α-casein磷酸化蛋白,实现了简单、快速、高效的磷酸化肽段和蛋白的富集分离.同时,通过MALDI-TOF串级质谱分析,成功地完成了在优化条件下分离出的磷酸化肽段磷酸位点的鉴定.

关键词：基质辅助激光解吸飞行时间质谱、介孔氧化铁、磷酸化肽段、磷酸化蛋白、快速富集分离

所属期刊栏目：36

分类号：TQ4;R96

资助基金：国家自然科学基金资助项目.20505004、20405003、20405005、30530040

在线出版日期：2008-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：885-889