补肾活血方调节miRNA-140-5p表达干预人原代软骨细胞退变的研究

摘要：

目的:研究补肾活血方含药血清对白细胞介素-1β(IL-1β)刺激的人原代软骨细胞miRNA-140及其靶基因表达的影响.方法:通过采用生理盐水和补肾活血方分别灌胃雌性SD大鼠制备空白血清和含药血清.将人软骨细胞种植于6孔板并且分为3组.空白对照组和模型对照组细胞培养的血清采用大鼠空白血清,含药血清组细胞培养的血清采用大鼠含药血清.另外,模型对照组和含药血清组细胞加入10 ng?mL-1 IL-1β.以上各组细胞设3个复孔,继续培养细胞至IL-1β 刺激后24 h收集各组细胞提取总RNA.采用RT-qPCR检测软骨细胞miRNA-140-5p以及聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMTS-5)、胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)mRNA表达.结果:与空白对照组比较,模型对照组软骨细胞miRNA-140-5p表达和IGFBP5 mRNA表达明显降低(P<0.05),ADAMTS-5和MMP-13mRNA表达明显升高(P<0.05);与模型对照组比较,补肾活血方含药血清显著升高了IL-1β刺激的软骨细胞miRNA-140-5p表达和IGFBP5 mRNA表达(P<0.05),并且显著降低ADAMTS-5和MMP-13 mRNA表达(P<0.05).结论:补肾活血方含药血清可以抑制IL-1β 导致的人原代软骨细胞退变,其作用机制与提高miRNA-140-5p和IGFBP5 mRNA表达,降低ADAMTS-5和MMP-13 mRNA表达有关.

关键词：骨关节炎、膝、补肾活血方、miRNA-140-5p、软骨细胞

所属期刊栏目：6

分类号：R73;R76

资助基金：广东省自然科学基金2014A030310128;广东省科技厅社会发展领域科技计划项目2013B021800213,2013B021800214;广东省中医优势病种突破项目粤中医函〔2015〕19号;广东省中医药局科研项目20164002;广东省中医药局科研项目20172008

在线出版日期：2017-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：10-14