基因改造AiiA蛋白在毕赤酵母中的表达
基于毕赤酵母基因组偏好密码子数据表对编码AiiA蛋白的碱基序列进行密码子优化,并构建多拷贝重组OaiiA表达载体pPICZαB-xOaiiA(x=l,2,3),成功表达出具有活性的AiiA蛋白.实验结果表明,优化后OaiiA基因的表达量(2.64 mg·L-l)较优化前aiiA的表达量(1.38 mg· L-l)提高约两倍.优化后二拷贝和三拷贝表达量分别为2.84mg· L-1和2.93 mg· L-l.结果表明密码子优化可以有效提高AiiA蛋白在毕赤酵母中的表达,但是多拷贝表达载体对AiiA的表达促进作用并不显著.提示未来在探索AiiA蛋白在毕赤酵母中的高表达时,通过增加拷贝数来提高产量并不是一个很好的途径,而进行密码子的优化可以有效提高产量.
N-酰基高丝氨酸内酯酶(AHLase)、密码子优化、多拷贝、毕赤酵母
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Q786(基因工程(遗传工程))
福建省自然科学基金资助项目2012J01123;福建省教育厅资助项目JK2012009
2015-12-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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