10.3969/j.issn.1000-467X.2005.12.013
CPP-Id对小鼠树突细胞表面共刺激分子表达的影响
背景与目的:B细胞淋巴瘤的独特型(idiotype,Id)免疫球蛋白可作为肿瘤特异性抗原诱发免疫反应抑制肿瘤的发展.本实验拟探讨小鼠淋巴瘤细胞株A20中Id-CTL表位的存在,了解细胞穿透肽(cell-penetrating peptide,CPP)负载的Id(CPP-Id)进入树突细胞(dendritic cell,DC)的量,以及在细胞内的分布和进入细胞的时相,同时检测其对DC表面标志表达的影响.方法:用RT-PCR方法扩增A20细胞株的Id抗原CTL(cytotoxicity lymphocyte)表位的基因片段,并测序确定氨基酸的序列;通过流式细胞仪检测CPP-Id与Id进入小鼠DC的量的差异及抗原负载前后的DC表型的表达;共聚焦显微镜观察CPP-Id进入细胞的过程及时间;荧光显微镜观察CPP-Id在细胞内的分布.结果:RT-PCR扩增产物为660 bp的片段,测序结果表明A20细胞株的Id抗原CTL表位的基因存在.共聚焦显微镜检测显示CPP-Id能在最初200 s内快速进入DC,单纯Id进入DC的量很少.10 μmol/L的CPP-Id负载的DC细胞平均荧光强度(MFI)高于单独使用Id组(4.35±0.48 vs.1.14±0.33,P<0.005);两者负载的DC表面标记CD80、CD86、CD54及MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类分子表达均比未成熟DC明显增加.结论:CPP-Id比Id进入小鼠DC的量明显增加,CPP肽可以提高Id抗原进入细胞的效率;CPP-Id体外冲击DC后,可以使DC表面MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类分子,协同刺激分子CD80、CD86以及粘附分子CD54表达显著增高,有利于活化CTL.
树突细胞、淋巴瘤、A20细胞、独特型、细胞穿透肽、细胞表面标志、小鼠
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R730.3(肿瘤学)
2006-01-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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