反义寡核苷酸沉默乙酰肝素酶对食管鳞癌细胞株TE-13侵袭能力的影响

摘要：

背景与目的:乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)为降解硫酸乙酰肝素多糖的内糖苷酶,在多种恶性肿瘤的侵袭转移中发挥重要作用.本研究旨在探讨Hpa在食管鳞癌细胞株TE-13中的表达和转染Hpa反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对TE-13细胞的影响.方法:脂质体法转染人工合成的Hpa ASODN片段,应用RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学方法检测转染前后Hpa基因和蛋白表达的变化,Matrigel侵袭实验观察转染ASODN后TE-13细胞侵袭行为的改变.结果:在TE-13细胞中,RT-PCR扩增得到大小为585 bp的Hpa基因条带,Western blot检测到50 ku大小的Hpa蛋白,免疫细胞化学染色表明Hpa主要定位于胞浆和胞膜.转染不同浓度Hpa ASODN后,RT-PCR、Western blot和细胞免疫染色均证实TE-13细胞Hpa基因和蛋白表达下调,且随Hpa ASODN的浓度增高,基因和蛋白表达量逐渐降低(P＜0.05),不同浓度Hpa ASODN组间有显著性差异(P＜O.05).Matrigel侵袭实验中,转染不同浓度Hpa ASODN后,侵袭至下室面的TE-13细胞数均下降(P＜0.05).随Hpa ASODN浓度的增高,侵袭至下室面的TE-13细胞个数逐渐减少(P＜0.05),不同浓度Hpa ASODN组间有显著性差异(P＜0.05).结论:TE-13细胞存在Hpa基因的表达.Hpa ASODN能显著降低Hpa基因表达量,并且使TE-13细胞侵袭力明显下降.

关键词：食管肿瘤、TE-13细胞、乙酰肝素酶、寡核苷酸、反义、细胞侵袭

所属期刊栏目：24

分类号：R735.1(肿瘤学)

资助基金：河北省卫生厅科研项目04029

在线出版日期：2006-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1431-1435