血管形成抑制因子HIAF-1在昆虫细胞中的高效表达和活性研究

摘要：

背景与目的:大肠杆菌表达的人抑制血管生成因子-1(human inhibiting angiogenesis factor-1, HIAF-1)可抑制肿瘤血管的形成.本研究在昆虫细胞中表达HIAF-1,并研究其生物活性.方法:用DNA重组技术,构建了重组杆状病毒表达载体pAcuW51-HIAF-1,用Cellfectin将其与线性病毒DNA共转染昆虫细胞sf9,获得重组病毒.用SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定重组病毒感染的昆虫细胞中重组HIAF-1重组蛋白的表达.重组蛋白经亲和层析纯化后,在体外用MTT法检测其对内皮细胞的作用,用食管癌移植瘤研究其体内抑瘤活性.结果:在昆虫细胞中高效表达了分子量为26kDa的HIAF-1重组蛋白,其表达量可达昆虫可溶性蛋白的5%-10%.重组HIAF-1蛋白不仅在体外显著抑制内皮细胞的生长,IC50值为3.1μg/ml,而且显著抑制食管癌移植瘤的生长.结论:在昆虫细胞中高效表达了HIAF-1重组蛋白;HIAF-1重组蛋白的生物活性优于相应的原核重组蛋白.

关键词：血管形成、杆状病毒表达系统、基因表达

所属期刊栏目：21

分类号：R730.5(肿瘤学)

资助基金：北京市自然科学基金7982034

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：245-248