两种基因重组免疫毒素导向治疗乳腺癌的细胞毒活性研究

摘要：

目的:探讨HELβ1-PE33、HELβ1-PE38KDEL两种基因重组免疫毒素对乳腺癌细胞的细胞毒活性.方法:构建亚克隆质粒pHELβ1-PE33;诱导生成、纯化HELβ1-PE33蛋白,并用凝胶电泳法检测其与HELβ1-PE38KDEL蛋白纯度;采用MTT法、软琼脂集落形成法检测这两种蛋白对乳腺癌细胞增殖的影响,比较两种蛋白在不同的乳腺癌细胞系中的细胞毒活性.结果:纯化后的两种蛋白均有导向作用,其纯度均超过98%.在免疫毒素敏感乳腺癌细胞内,MTT实验表明HELβ1-PE38KDEL对DY36T2、MDA-MB-453、47T1LZ11、BT474M1、SKBR3的IC50分别为(0.25±0.02)ng/ml、(0.35±0.05)ng/ml、(0.02±0.02)ng/ml、(0.02±0.02)ng/ml、(20.3±0.01)ng/ml,而HELβ1-PE33的IC50分别为(5.90±0.05)ng/ml、(3.91±0.11)ng/ml、(0.09±0.02)ng/ml、(0.06±0.05)ng/ml、(125.00±0.12)ng/ml、(10.80±0.01)ng/ml,两者的细胞毒活性在统计学上有显著意义(P＜0.01);软琼脂集落形成实验表明HELβ1-PE38KDEL对MDA-MB-453、BT474M1的IC50分别为(0.05±0.01)、(0.005±0.000)ng/ml,而HELβ1-PE33对上述两种细胞的IC50则为(5.00±0.02)ng/ml和(0.05±0.01)ng/ml,二者的细胞毒活性在统计学上有显著意义(P＜0.01).HELβ1-PE33和HELβ1-PE38KDEL对乳癌细胞抑制作用的时间效应关系表明,HELβ1-PE38KDEL的细胞毒活性优于HELβ1-PE33.结论:KDEL肽段在增强免疫毒素的细胞毒作用中起重要作用,在增强细胞毒导向治疗方面,KDEL所起的作用比减小蛋白分子量、省去蛋白裂解活化等因素更重要.

关键词：乳腺癌细胞、导向治疗、免疫毒素、基因重组、细胞毒作用

所属期刊栏目：20

分类号：R737.905(肿瘤学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1241-1245