10.3969/j.issn.1000-467X.2001.05.001
HR24L基因编码的蛋白质定位于细胞核内并 参与细胞周期的调节
目的:研究 HR24L基因编码的蛋白质在细胞内的定位及其对细胞周期的影响。方法 :PCR方法扩增 HR24L开放阅读框序列,克隆入绿色荧光蛋白载体 pEGFP C2和逆转录病毒载体 pDOR neo,分别经脂质体介导转染入 HeLa细胞。荧光显微镜观察 HeLa GFPHR24Ls细胞, Southern印迹杂交分析外源性 HR24LcDNA的整合状况。去血清处理细胞,观察 HR24L基因对细胞周期的影响。 Western印迹分析 HR24L基因对 p53表达的影响。结果 :转染获得了 HeLa GFPHR24L、 HeLa HR24Ls和 HeLa HR24La细胞。荧光显微镜观察证实 HR24L编码的蛋白质位于核内。 Southern印迹分析证实 HeLa HR24Ls和 HeLa HR24La细胞中外源性 HR24LcDNA已整合入基因组。与对照和空载体细胞相比, HeLa HR24Ls细胞中 HR24L mRNA表达升高, HeLa HR24La细胞中 HR24L mRNA表达降低。经过 24 h去血清培养后, HeLa HR24Ls细胞中 G2/M期细胞明显较其他细胞增多( P<0.05),其他 3种细胞则无明显差别。重新加入血清培养后 24 h这种差别消失。 Western印迹分析表明, HR24L基因对 p53的表达无明显影响。结论 :HR24L基因编码的蛋白质位于细胞核内且参与细胞周期的调节。
HR24L基因、转染、蛋白质定位、细胞周期
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Q753(分子遗传学)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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