应用蛋白质组学技术筛选鉴定锌指蛋白139调控的胃癌转移相关蛋白质

摘要：

目的：以胃癌SGC7901细胞原位移裸鼠模型为对象，通过荧光双向差异凝胶电泳（2D-DIGE）结合液质联用（LC-MS）质谱分析技术鉴定ZNF139调控的胃癌转移相关蛋白质。方法合成针对ZNF139的小干扰RNA（ZNF139-siRNA），以ZNF139-siRNA转染人胃癌细胞株SGC7901，G418筛选。以ZNF139-siRNA质粒转染的胃癌细胞、阴性质粒转染的胃癌细胞及普通胃癌细胞分别进行裸鼠胃癌原位移植。造模成功后取出原位移植瘤及腹腔转移淋巴结。荧光双向差异凝胶电泳（2D-DIGE）技术分别分离ZNF139-siRNA各组原位移植瘤及腹腔转移淋巴结蛋白质；选定差异点，胶内酶解后，液质联用（LC-MS）质谱分析技术鉴定蛋白质。蛋白印迹（Western blot）技术验证差异蛋白质的表达。结果转染ZNF139-siRNA质粒后SGC7901细胞中ZNF139的表达受到有效抑制。与阴性质粒组及空白组比较，阳性质粒组原位移植瘤生长更慢（P<0.05），且腹腔淋巴结转移率更低（P<0.05）。蛋白质组学结果发现在阳性质粒组原发灶中Fascin、hnRNPA2/B1表达下调，ANXA1表达上调；阳性质粒组转移淋巴结中ANXA5表达下调（P<0.05）。Western blot验证结果与蛋白质组学结果相符。结论 ZNF139可能通过调节Fascin、hnRNPA2/B1、ANXA1、ANXA5促进胃癌淋巴结转移。

关键词：胃癌、锌指蛋白139、原位移植裸鼠、淋巴结转移、蛋白质组学

分类号：R73;R96

资助基金：国家自然科学基金81072033，81372580；河北省自然科学基金C2010000619；河北省普通高校强势特色学科资助项目冀教高[2005]52；河北省科技支撑项目14277779D；河北省卫生厅河北省卫生厅重大医学科研课题zd2013040Supported by National Natural Science Foundation of China 81072033,81372580

在线出版日期：2015-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：360-364