10.3969/j.issn.1007-5038.2024.01.008
鸡产蛋下降综合征病毒间接免疫荧光检测方法的建立及应用
为建立检测鸡产蛋下降综合征病毒(EDSV)的间接免疫荧光方法,并对该检测方法的各个步骤进行优化,以鸡产蛋下降综合征病毒多抗血清和FITC标记的兔抗鸡IgG为组合,对一抗和二抗的最适工作浓度和孵育时间进行了优化,对IFA方法进行了敏感性、特异性和重复性试验.结果表明,检测接种EDSV的96孔细胞培养板时,多抗血清的最适工作浓度为1∶320,孵育时间为45 min;FITC标记的兔抗鸡IgG的最适工作浓度为1∶200,孵育时间为30 min;病毒敏感性试验表明,该方法可以检测到10-2TCID50/mL的病毒;多抗血清敏感度试验表明,当多抗血清稀释到1∶1 280时仍可见较明显的特异性荧光;特异性试验表明,该方法只针对EDSV,而不与禽副流感病毒4型、鸡新城疫病毒等其他病原反应;批内重复性试验和批间重复性试验结果表明,该方法具有较好的重复性和可靠性.结果表明,建立的间接免疫荧光方法具有较高的灵敏度和较好的稳定性,可为我国禽源性生物材料EDSV的检测提供技术支持,有巨大的市场需求.
鸡产蛋下降综合征病毒、多抗血清、间接免疫荧光、优化
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S852.659.1;S858.31(动物医学(兽医学))
中国兽医药品监察所公益项目GY202105
2024-02-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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