脂多糖对牛乳腺上皮细胞自噬和凋亡的影响

摘要：

为探究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对牛乳腺上皮细胞(MAC-T)自噬和凋亡的影响,以MAC-T细胞为试验对象,用CCK-8和乳酸脱氢酶(LDH)法检测不同浓度LPS(100、150、200、250μg/mL),检测细胞的存活率和损伤,从上述分组中挑选浓度为0(对照)、50、100、200 μg/mL的LPS建立试验组,Hoechst33342检测细胞核形态,qPCR法检测 MAC-T细胞中 自噬和凋亡基因(LC3B、p62、BAX、BCL-2、ATG5、ATG7、Beclin-1、caspase-3)mRNA 的表达量,Western blot 检测 MAC-T 细胞中 自噬和凋亡(LC3B、p62、BAX、BBCL-2、ATG5、ATG7、BBeclin-1、caspase-3)相关蛋白表达.结果显示,MAC-T 细胞的活力会随着LPS的浓度和时间的推移下降,细胞上清中的LDH随着LPS浓度上升而增加,Hoechst33342染色后可以发现细胞核形态出现异型性,染色质碎裂、固缩.qPCR和Western blot检测结果显示LPS在50～100 μg/mL浓度下可引起MAC-T细胞自噬,200 μg/mL可抑制此过程,同时细胞凋亡随着LPS浓度上升而加剧.说明LPS可引起MAC-T细胞自噬同时诱导细胞凋亡,为大肠埃希氏菌诱导牛乳腺炎发生机制的研究提供参考.

关键词：牛乳腺上皮细胞、脂多糖、自噬、凋亡

所属期刊栏目：44

分类号：S857.26(动物医学（兽医学）)

资助基金：河南省科技攻关项目;河南省科技攻关项目;国家肉牛牦牛产业技术体系项目

在线出版日期：2023-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：69-75