10.3969/j.issn.1007-5038.2022.11.005
胞内劳森氏菌鞭毛蛋白Flic的可溶性表达与免疫原性分析
采用PCR扩增出猪回肠炎胞内劳森氏菌的鞭毛蛋白基因Flic(LI0710),再将目的基因和Msyb标签插入原核表达载体pET-28a,构建表达质粒pET28a-Msyb-Flic.然后将测序正确的质粒转化至大肠埃希氏菌BL21(DE3)中,0.5 mmol IPTG诱导阳性菌株进行蛋白表达,采用超声破碎仪破碎菌体收集蛋白.最后使用NI柱摸索纯化条件获得目的蛋白,采用Western blot检测蛋白特异性,免疫小鼠检测抗体水平.结果表明,获得了可溶性表达的胞内劳森氏菌鞭毛蛋白Flic(LI0710),用Flic(LI0710)蛋白免疫小鼠后能产生较高水平的特异性抗体,表达蛋白与小鼠胞内劳森氏菌抗血清可发生特异性反应.结果为胞内劳森氏菌亚单位疫苗的研究奠定了基础.
胞内劳森氏菌、鞭毛蛋白、原核表达、纯化
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S852.43;S858.28(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金;河南省高校科技创新团队项目
2022-11-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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