亚洲璃眼蜱和小亚璃眼蜱Ferritin 2基因的原核表达及蛋白特性预测

摘要：

铁蛋白2(ferritin 2,Fer2)是一类储存铁的蛋白,在蜱生理活动中起到解毒作用,是一种抗蜱疫苗候选抗原.利用原核表达系统,分别对亚洲璃眼蜱(H.as)和小亚璃眼蜱(H.an)Fer2基因进行了克隆、表达以及蛋白特性预测,为挖掘抗蜱疫苗候选抗原奠定基础.提取H.as和H.an总RNA,并反转录为cDNA,以此为模板克隆、表达出重组蛋白rHasFer2和rHanFer2,并分别用尿素透析法和亲和层析柱对2个重组蛋白进行了纯化;应用Western blot分析蛋白的反应原性;用Prot Param、TMHMM、SignalP-5.0、Antibody Epitope Prediction及SWISS-MODEL等软件对HasFer2和HanFer2序列进行蛋白特性预测.构建了重组质粒pGEX-4T-1/HasFer2和pET-28a/HanFer2,rHasFer2和rHanFer2均以包涵体形式表达,Western blot分析结果表明,2种蛋白可与相应阳性血清发生特异性反应.蛋白特性预测分析表明,Has-Fer2无跨膜区,不属于跨膜蛋白,分子质量为21.908 ku,等电点为5.542,主要存在于胞外(66.7％)和分泌系统的囊泡(22.2％);HanFer2有跨膜区,分子质量为23.033 ku,等电点为6.29,主要分布于胞质(34.8％)和胞外(26.1％);2种蛋白均有较高的抗原性,存在信号肽区域,均无T细胞表位,成功构建了蛋白3D模型.研究结果为探究Fer2在H.as和H.an中发挥的功能及抗蜱亚单位疫苗研制奠定了基础.

关键词：亚洲璃眼蜱;小亚璃眼蜱;铁蛋白Fer2;蛋白特性预测

所属期刊栏目：42

分类号：S852.746(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31660711

在线出版日期：2021-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：13-18