非洲马瘟病毒RT-LAMP检测方法的建立

摘要：

为了建立非洲马瘟病毒(AHSV)环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测方法,基于AHSV VP7基因保守序列,设计2对特异性扩增引物.通过对反应体系中各组分浓度,反应温度及时间的优化,建立了快速、灵敏的AHSV RT-LAMP检测方法,并对该方法特异性、灵敏性、重复性进行探索.结果表明,在63℃恒温下反应45 min,便可进行高效率的特异性扩增.反应产物经琼脂糖凝胶电泳和染料可视化鉴定,能够快速有效检测AHSV.用建立的方法检测马属动物易感的4种疫病病原,结果均为阴性,证实具有较高的特异性.灵敏性是RT-PCR的1000倍.建立了AHSV RT-LAMP检测方法,具有快速、特异、灵敏、操作简单、设备要求低的特点,适合用于现场A H SV快速检测.

关键词：非洲马瘟病毒、环介导等温扩增、检测

所属期刊栏目：38

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金："十二五"国家科技支撑计划项目2013BADl2804

在线出版日期：2018-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1-5