鸡MHCⅠα和β2m的原核表达与多克隆抗体的制备

摘要：

为制备 MHCⅠ基因工程疫苗的基础材料，构建了鸡 MHCⅠ分子重组质粒并进行原核表达，进而制备鸡 MHCⅠ分子的多克隆抗体。应用 PCR 方法，克隆鸡 MHCⅠα和β2m 基因，构建重组载体 pET-MHCⅠα和 pET-MHCⅠβ2m，经 PCR、双酶切和测序鉴定后，将重组质粒在大肠埃希菌 Rosetta 中进行诱导表达，融合蛋白纯化后，接种昆明小鼠制备多克隆抗体，血清稀释后用免疫印迹法（Western blot）分析。结果表明，鸡 MHCⅠα和β2m 基因在大肠埃希菌中成功表达，融合蛋白分子质量分别约为52．1 ku 和33．0 ku；制备的鼠抗鸡 MHCⅠα和β2m 链多克隆抗体，经 Western blot 检测证实抗体特异性较强，可进一步用于鸡 MHCⅠ分子的研究。

关键词：鸡MHCⅠ类分子、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：37

分类号：S852.4;S858.31(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31302044；安徽省科技攻关项目11010302119；安徽省教育厅自然科学研究重点项目KJ2013A203

在线出版日期：2016-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：38-41,42