柔嫩艾美耳球虫SAG2基因的克隆及其在卡介苗中表达

摘要：

为获得柔嫩艾美耳球虫SAG2的克隆株并在卡介苗中表达该蛋白,根据柔嫩艾美耳球虫SAG2基因序列和表达载体图谱设计特异性引物,引入HindⅢ和EcoR Ⅰ酶切位点,RT-PCR扩增SAG2基因,连接到pMD18-T载体.双酶切后,将SAG2基因插入到大肠埃希菌-分支杆菌整合表达载体pMV361中,获得重组质粒pMV361-SAG2,经电穿孔转染到卡介苗中,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析.结果成功构建了重组质粒pMD18-T-SAG2和pMV3 61-SAG2,SAG2在卡介苗中高效表达,表达产物能够被柔嫩艾美耳球虫阳性血清识别,表明具有良好的免疫原性,为下一步重组卡介苗对鸡球虫病的免疫保护研究奠定了基础.

关键词：柔嫩艾美耳球虫、SAG2基因、卡介苗、表达

所属期刊栏目：36

分类号：S852.723(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省科技发展计划项目201205071;吉林省科技攻关计划项目20150204070NY

在线出版日期：2015-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：13-17