表达猪圆环病毒2型Cap蛋白重组腺病毒的构建

摘要：

为研制表达猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白的重组腺病毒疫苗,根据PCV-2ORF2 (Cap)基因序列和耶尔森菌侵袭素C端(InvC)序列,克隆获得Cap和InvC基因后,插入pAdShttle-CMV载体构建重组穿梭载体pAdShttle-Cap-InvC,经PmeI线性化后,转化入BJ5183感受态细菌与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组获得重组腺病毒质粒pAd-Cap-InvC.重组质粒经Pac Ⅰ线性化后,转染HEK293细胞,连续传代后获得重组腺病毒.应用PCR、Western blot和间接免疫荧光(IFA)技术分别检测重组腺病毒中Cap和InvC基因及表达.结果表明,成功构建了表达PCV-2 Cap蛋白和InvC的重组腺病毒rAd-Cap-InvC,经过噬斑纯化和连续传代,重组腺病毒TCID50可达10-9.32/mL,为PCV-2重组腺病毒活载体疫苗的研发提供了基础材料.

关键词：猪圆环病毒2型、Cap蛋白、侵袭素蛋白C端、重组腺病毒

所属期刊栏目：36

分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：陕西省科技统筹创新工程计划项目2014KTCQ02-02;陕西省重点科技创新团队计划项目2013KCT-28

在线出版日期：2015-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1-7