牛病毒性腹泻病毒内标双重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

摘要：

为了对BVDV-1和BVDV-2进行同步检测,针对不同基因型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因组高度保守的5'-UTR核苷酸序列设计特异性引物(扩增长度为288 bp).为了指示假阴性结果,以牛GAPDH基因为内标基因,设计特异性引物(扩增序列长度为152 bp).通过反应条件的优化,建立了BVDV通用型内标双重RT-PCR检测方法,该方法可以监测RNA提取与RT-PCR反应过程,指示假阴性结果的发生.该方法的检测灵敏度约为100 TCID50/mL,且具有较好的特异性和可重复性.通过对566份临床样品检验,检测到阳性样品19份,阳性率3.36％.该方法可用于临床样品中BVDV检测,并可对检测结果进行质量控制.

关键词：牛病毒性腹泻病毒、内标、双重反转录-聚合酶链反应、共扩增

所属期刊栏目：35

分类号：S852.659.5;Q789(动物医学（兽医学）)

资助基金：新疆自治区高新技术项目201010101,201141147;国家质量监督检验检疫总局科研项目2011IK017

在线出版日期：2014-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：17-21