PADRE-TGFβ1融合蛋白的原核表达及鉴定

摘要：

构建PADRE-TGFβ1原核表达质粒,并对其进行诱导表达和反应原性分析.对PADRE、联接序列(Linker)及TGFβ1的基因序列进行密码子优化,采用全基因合成的方法人工合成全长PADRE-Linker-TGFβ1序列,合成产物克隆至pET-28a(+)质粒.将构建好的质粒转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经1 mmol/L IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析,在约19.87 ku处出现与预期目的蛋白一致的新蛋白条带,Western blot鉴定结果显示,该蛋白能够与TGFβ1抗体发生特异性结合.表明成功构建了pET28-PADRE-TGFβ1原核表达质粒,表达的融合蛋白质具有TGFβ1的反应原性,为TGFβ1自体疫苗的制备及应用奠定了基础.

关键词：转生长因子β1、通用型辅助性T淋巴细胞表位、融合蛋白、原核表达

所属期刊栏目：32

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目30972167

在线出版日期：2011-06-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：61-65