猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆及原核表达载体的构建

摘要：

参考GenBank上公布的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点序列,应用Primer6.0设计一对含酶切位点的引物,用于RT-PCR扩增B、C抗原位点目的片段,将扩增产物连接于peasy-T克隆载体上,构建克隆栽体,用Eco R Ⅰ和Xho Ⅰ对表达载体PET-32a(+)和重组质粒进行酶切,将酶切产物亚克隆至PET-32a(+)多克隆位点上,连接、转化至BL21(DE3),构建B、C位点的原核表达载体,并对阳性重组质粒进行酶切、PCR和测序鉴定.所扩增的目的片段的大小为357 bp,与原核表达载体连接后,经核苷酸及推导的氨基酸序列分析表明,该基因与其他猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性,说明成功地构建了TGEV S基因B、C抗原位点的原核表达载体.TGEV S基因B、C抗原位点原核表达载体的成功构建,为TGEV诊断方法的建立提供良好的技术基础.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒、S基因B、C抗原位点、克隆、原核表达载体

所属期刊栏目：29

分类号：S852.659.6;Q782(动物医学（兽医学）)

资助基金：农业应用新技术北京市重点实验室开放课题KF2004-04;北京市教委科研计划资助项目KM200810020001

在线出版日期：2008-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

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