人膀胱逼尿肌中肾上腺素能β3受体基因的克隆及其载体的构建

摘要：

目的: 克隆人膀胱逼尿肌中肾上腺素能β3受体基因全长,并构建其反义真核表达载体. 方法:采用RT-PCR法从人膀胱逼尿肌中扩增出β3-AR的全长cDNA序列,上游引物5′端加有BamHI及ClaI酶切位点,下游引物加有HindIII酶切位点,将该片段插入pUC18载体中,摇菌扩增后,用ClaI和HindIII切下目的基因,然后将目的片段反向插入逆转录病毒表达载体pLNCX上. 最后对产生的重组子进行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定. 结果:经琼脂糖凝胶鉴定,所克隆的目的基因大约为1.2 kb,并成功地连接到逆转录病毒载体pLNCX上,经测序证明,插入的目的片段其碱基序列与Genbank上报道的完全一致,且插入载体的方向完全正确. 结论:成功克隆了人逼尿肌中肾上腺素能β3受体基因的全长cDNA序列和构建了其反义真核表达载体.

关键词：受体、肾上腺素能β3、载体

所属期刊栏目：27

分类号：R73.34(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30170325

在线出版日期：2006-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1199-1201