外源CRE顺式元件对慢性吗啡作用SK-N-SH细胞CREB蛋白表达及DNA结合活性的影响

摘要：

目的: 研究以cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)为靶点的CREB转录因子诱骗(CRE-transcription factor decoy oligodeoxynucleotide、CRE-decoy ODN) 对慢性吗啡作用SK-N-SH细胞CREB相关指标的影响.方法: 体外合成含cAMP反应元件 (cAMP response element,CRE)的单链寡核苷酸,以 DOTAP为转移介质,将CRE-decoy ODN与慢性吗啡作用和纳络酮催促戒断的SK-N-SH细胞共同孵育,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及放射自显影检测CRE-decoy ODN细胞掺入;EMSA检测CRE-decoy ODN与转录因子CREB结合的特异性以及其对慢性吗啡作用SK-N-SH细胞CREB的DNA结合活性影响;Western Blot检测CREB-1及磷酸化CREB-1蛋白表达.结果: 以DOTAP为介质,将CRE-decoy ODN成功导入SK-N-SH细胞;慢性吗啡作用及纳络酮催促戒断使SK-N-SH细胞CREB的DNA结合活性和磷酸化CREB-1蛋白表达明显增高(P值均<0.01),CREB-1蛋白无明显改变,CRE-decoy ODN可抑制CREB的DNA结合活性和磷酸化CREB-1蛋白表达的改变(P<0.01),对CREB-1蛋白表达无明显影响.结论: CRE-decoy ODN可特异抑制慢性吗啡作用及纳络酮催促戒断SK-N-SH细胞CREB的DNA结合活性和磷酸化CREB-1蛋白表达的增高,对CREB-1蛋白表达无明显影响.

关键词：吗啡、SK-N-SH细胞株、DNA结合蛋白质、环AMP反应性、CRE-decoy ODN

所属期刊栏目：26

分类号：R89(法医学)

在线出版日期：2005-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：492-496