阻滞eIF-4E对乙酰肝素酶mRNA核浆转运及其表达的影响

摘要：

目的:确定结肠癌LS-174T细胞中过量表达的真核细胞起始因子-4E(eukaryotic initiation factor-4E,eIF-4E)是否影响乙酰肝素酶(heparanase)mRNA的核浆转运,并改变乙酰肝素酶表达水平. 方法:脂质体包裹与eIF-4E mRNA翻译起始点互补的asODN转染人大肠腺癌细胞LS-174T. 使用Western blot, RT-PCR方法分别检测eIF-4E被阻抑后其转录和翻译水平的改变. 乙酰肝素酶mRNA在细胞内核浆分布水平采用Northern blot检测,其蛋白表达采用Western blot检测. 结果:asODN转染显著抑制eIF-4E基因和蛋白表达. 伴随eIF-4E被阻抑,Northern blot结果显示更多乙酰肝素酶mRNA滞留在细胞核,且其蛋白表达量也下降. 结论:阻抑eIF-4E可影响LS-174T细胞乙酰肝素酶mRNA核浆转运,并降低乙酰肝素酶蛋白表达. 此反义策略可应用于实验性和临床抗人类大肠癌转移的基因治疗.

关键词：转染、真核细胞起始因子4E、乙酰肝素酶、信使RNA、核浆转运

所属期刊栏目：24

分类号：R541(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：广东省自然科学基金010643;教育部高校骨干教师资助计划

在线出版日期：2003-12-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1976-1979