粒酶B和穿孔素mRNA竞争模板的构建

摘要：

目的: 为测定肾移植术后患者尿中粒酶B和穿孔素mRNA水平构建其相应的竞争模板. 方法: 取肾移植术后患者尿样,通过RT-PCR反应,获得含特定酶切位点的粒酶B和穿孔素片段,酶切粒酶B和穿孔素片段,分别在其间插入44 bp和36 bp外源性DNA片段,连接入PGEM4载体. 结果: 经酶切鉴定及DNA测序证实,外源性DNA正确插入粒酶B及穿孔素片段,竞争模板引物结合区域与靶序列一致,所构建粒酶B竞争模板与粒酶B片段相差29 bp,所构建粒酶B竞争模板与粒酶B片段相差36 bp. 所构建新载体适合作为定量PCR的竞争模板. 结论: 基因重组方法可成功构建用于定量PCR的竞争模板,方法简便可行.

关键词：穿孔素、颗粒酶B、竞争逆转录聚合酶链反应、RNA、信使

所属期刊栏目：24

分类号：R656.7(外科学各论)

在线出版日期：2003-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1311-1313