人原始生殖细胞的体外分离及培养

摘要：

目的: 探讨人原始生殖细胞(PGCs)的体外分离培养条件及相关影响因素. 方法: 以胎鼠成纤维细胞为滋养层,用1.25 g*L-1胰蛋白酶室温下消化胚胎组织3～5 min,分离培养PGCs细胞并观察其克隆形成率;进而观察不同浓度白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF)对PGCs克隆在传代及未分化状态的维持等方面的影响;最后对PGCs克隆进行碱性磷酸酶活性鉴定及染色体组型分析. 结果: 采用胰蛋白酶消化法可对PGCs进行分离培养;PGCs在传代过程中其克隆形成率亦逐渐降低;培养基中无LIF时,PGCs克隆可分化为心肌样收缩细胞团;LIF在5 ～10 g*L-1时利于维持PGCs克隆的未分化状态;PGCs克隆的碱性磷酸酶染色呈强阳性,在传代过程中其染色体组型未见变异. 结论: 可从人类早期胚胎中分离培养PGCs细胞,培养基中LIF的浓度在5～10 g*L-1时以利于提高PGCs培养的成功率并抑制其过早分化.

关键词：原始生殖细胞、细胞分化、白血病抑制因子

所属期刊栏目：24

分类号：R644(创伤外科学)

在线出版日期：2003-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1262-1264