c-myc基因核酶对靶mRNA的切割作用

摘要：

目的: 构建c-myc基因核酶及其靶mRNA的体外转录载体,探讨核酶对靶mRNA的体外切割作用. 方法: 通过计算机分析c-myc基因mRNA的二级结构,设计核酶基因序列. 采用DNA合成仪合成核酶基因,以克隆技术将核酶基因构建入pGEM3Zf(+)体外转录载体. 将大鼠c-myc基因第2外显子及部分第3外显子的基因片段克隆入pGEM7Zf(-)体外转录载体. 分别进行体外转录获得核酶及靶mRNA. 在含有Mg2+的反应体系中,进行核酶对靶mRNA的体外切割反应. 结果: 经限制性内切酶酶切鉴定,核酶基因准确克隆入pGEM3Zf(+)载体. 经DNA自动序列分析仪测序分析,大鼠c-myc基因第2外显子及部分第3外显子的基因片段准确克隆入pGEM7Zf(-)载体. 核酶对靶mRNA的体外切割活性约为64.5%. 结论: 该核酶具有切割靶mRNA的活性,可进一步用于细胞内和体内研究.

关键词：基因、myc、DNA限制酶类、转录、遗传

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分类号：R730.5(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金39600064

在线出版日期：2003-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1249-1252