肝癌相关抗原HAb18G胞外区片段的原核表达与免疫学活性分析

摘要：

目的: 利用大肠杆菌高效表达肝癌相关抗原HAb18G胞外区片段,并分析其与相应抗体的结合活性,进而明确表达产物用于筛选基因工程抗体的可行性.方法: 用PCR技术扩增出HAb18G胞外区基因片段,克隆入原核表达载体pGEX-4T-3中,筛选及鉴定阳性重组子,IPTGv诱导表达后对表达产物进行纯化及复性等处理,同时利用SDS-PAGE, Western-Blot以及ELISA等方法检测蛋白表达情况及其免疫学特性.结果: 成功构建了肝癌相关抗原HAb18G胞外区片段的原核表达载体pGEX-4T-3/HAb18GE,并在大肠杆菌中成功实现高效融合表达.表达蛋白Mr 46 000,表达量约占菌体总蛋白量的43%,表达产物主要以包涵体形式为主.另外,表达蛋白在变性和非变性的条件下均可以与HAb18G mAb特异性结合.结论: 原核融合表达的HAb18G胞外区片段可以替代天然的HAb18G蛋白,以用做抗原来筛选新型的基因工程抗体.

关键词：肝肿瘤、抗原、肿瘤、胞外区、融合表达

所属期刊栏目：24

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA215101

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1057-1060