10.3321/j.issn:1000-2790.2001.12.002
人源性胃癌抗体IgG1Fab噬菌体表面展示文库的构建
目的利用噬菌体表面展示技术,构建人源性胃癌抗体IgG1 Fab噬菌体表面展示文库. 方法从胃癌手术患者胃一级站淋巴结中提取总RNA,反转录成cDNA后,用PCR扩增人IgG1 Fd段及κ轻链,并克隆至噬菌粒载体pCOMB3中,转化宿主菌株XL1-Blue,以辅助噬菌体M13K07超感染噬菌粒文库,构建成人源性胃癌抗体IgG1 Fab噬菌体表面展示文库. 结果得到一个含克隆数为1.2×106,实际滴度约为2.56×1015 pfu*L-1的IgG1 Fab片段的噬菌体表面展示文库. 结论 IgG1 Fab片段的噬菌体表面展示文库的成功构建,为下一步利用亲和富集筛选技术,获得具有胃癌表面抗原结合活性的融合抗体及可溶性抗体奠定了基础.
胃肿瘤、人抗体、肿瘤、噬菌体
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R392-33
国家自然科学基金39870742
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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