人源性羧肽酶A突变体基因的构建及表达

摘要：

@@目的　从人正常肺组织中提取羧肽酶A基因并进行定点突变. 方法　从人正常肺组织中提取RNA，并进行逆转录得到人羧肽酶A (hCPA). 以计算机模拟hCPA的结构，寻找合适的突变位点. 用PCR重叠延伸法，对羧肽酶A进行定点突变,并在大肠杆菌中表达. 结果　序列分析表明，所获hCPA的核苷酸序列为1251 bp，编码417个氨基酸. hCPA突变体(mhCPA)基因的1126位核苷酸由G变为A，其余核苷酸序列均未发生变化，相应的此突变体蛋白质的376位核苷酸残基由丙氨酸突变为苏氨酸. 将mhCPA基因在E.coli中诱导表达3 h后,表达量高达30%左右. 结论　成功地构建并表达了mhCPA基因，为hCPA在肿瘤的“ 抗体导向酶-前药疗法 ” (ADEPT)中的应用奠定了基础 .(潘伯荣)

机标关键词：人源性、羧肽酶、突变体基因、核苷酸序列、定点突变、肺组织、重叠延伸法、诱导表达、突变位点、提取、大肠杆菌、药疗法、苏氨酸、逆转录、机模拟、分析表、蛋白质、丙氨酸、表达量、氨基酸

所属期刊栏目：22

分类号：R39;R97

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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