BMP2,4 mRNA在BALB/c系小鼠颅面部发育中的定位表达

摘要：

@@0　引言　骨形成蛋白（Bone morphogenetic Proteins，BMPs）属于TGF-β超家族，最初从牛的脱矿骨骨基质提取出来，在活体内可诱导异位成骨. 但近年来的研究表明，BMPs还是生长和发育中的调控分子. 为了探讨BMPs在颅面部发育过程中的表达、区域及变化，为进一步研究颅面部畸形（如腭裂、唇裂、牙齿发育畸形等）的发生机制打下基础，作者检测了BMP2,4在颅面部各组织正常发育中的表达模式.
1　材料和方法
1.1　材料　BALB/c近交系孕鼠在妊娠期第14,15,16日分别被脱椎处死，取胎鼠头部固定于40 g*L-1多聚甲醛，常规脱水包埋，作头部冠状切片.
1.2　方法　 质粒pSP-65和Bluescript SK分别含有BMP2 cDNA和BMP4 cDNA片段, 分别由美国基因研究所Dr.Wozney和得克萨斯大学JianQuan Feng提供，采用随机物延伸法标记地高辛作为探针. 石蜡切片经常规脱蜡至水及0.1 mol*L-1 PBS后，分别用0.2 mol*L-1 HCL和蛋白酶K处理，乙醇脱水干燥. 42℃杂交20 h后，分别用2×SSC,1×SSC, buffer Ⅰ, bufferⅡ依次充分洗涤. 羊血清封闭30 min后，滴加抗标记碱性磷酸酶地高辛抗体2 h，洗涤后用显色液（buffer Ⅲ 1000 μL，左旋米唑0.24 mg, NBT 4.5 μL及BCIP 3.5 μL）暗处显色2 h，TE液中止反应，常规脱水透明封片.
实验对照为除去探针的空白对照及RNase消化对照. 阳性对照为已反复证明为有阳性反应的骨肉瘤标本.

关键词：骨形成蛋白、颅面部发育、原位杂交

所属期刊栏目：22

分类号：R780.2(口腔科学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：670-671