10.3321/j.issn:1000-2790.2000.11.019
人增生性瘢痕组织中微血管内皮细胞的分离、纯化和培养
目的微血管内皮细胞(MEC)增殖和血管发生存在于很多生理和病理过程中,为体外重建人增生性瘢痕组织微血管内皮细胞(HSMEC)生长模型. 方法正常人包皮和增生性瘢痕经1.25 g.L-1 dispase和1.25 g.L-1胰蛋白酶依次消化4℃ 24 h后,机械挤压分离组织内HSMEC和人真皮微血管内皮细胞(HDMEC),经5000 U.L-1 bFGF, 200 mL.L-1胎牛血清的DMEM内培养和0.1 g.L-1胰蛋白酶, 0.15 mmol.L-1 EDTA的TE分离、纯化,组织学HE染色和Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色,观察MEC的阳性细胞百分数. 结果 MEC在含bFGF培养基中增殖旺盛,少量混生的成纤维细胞经TE分离MEC而被基本遗弃, 3代MEC能获得97.0%~98.0%的纯度,明显高于原代培养(P<0.01),HSMEC形态学与HDMEC无明显差异. 结论低浓度bFGF和TE细胞分离液分别对MEC的培养和纯化有可靠作用, HSMEC的培养成功为烧伤创面愈合和瘢痕增生机制的研究扩展了空间.
人、增生性瘢痕、微血管内皮细胞、培养
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R622.1(整形外科学(修复外科学))
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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