重组肌腱蛋白-R不同功能片段的表达、纯化和生物学功能

摘要：

目的将肌腱蛋白-R不同功能片段在原核中表达、纯化,并研究其初步的生物学功能. 方法将编码肌腱蛋白-R不同功能片段的表达质粒pGEX-EGFL, pGEX-EGFS, pGEX-FN1-2, pGEX-FN6-8, pGEX-FG及空载pGEX-KG转化入E.Coli JM109中. 用IPTG诱导表达,以谷胱甘肽琼脂糖为填充料进行亲合层析,纯化所表达的融合蛋白. 以纯化的融合蛋白作为培养液成分, GST为对照,观察纯化的肌腱蛋白-R各功能片段对体外培养脊髓细胞活性及突起生长的影响. 结果 肌腱蛋白R的5个片段在大肠杆菌中都有表达,通过谷胱甘肽琼脂糖亲合层析,都得到了初步纯化. 通过对培养细胞进行MTT染色,NSE染色后图像分析,结果表明,EGFL,FN1-2促进神经元的存活,EGFL,EGFS和FN6-8对突起的生长有明显的促进作用. 结论肌腱蛋白-R的不同功能片段可以通过大肠杆菌表达, 经纯化获得蛋白,肌腱蛋白-R不同的片段对体外培养的脊髓细胞有不同的作用.

关键词：肌腱蛋白-R、细胞外基质、表达、纯化、功能

所属期刊栏目：21

分类号：Q513.2(蛋白质)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1182-1184