10.16781/j.CN31-2187/R.20220623
黄连化浊胶囊对分泌及Ras相关GTP酶1A敲除诱导的外被蛋白Ⅱ功能障碍胰岛β细胞内质网应激的干预效果
目的 考察黄连化浊胶囊对分泌及Ras相关GTP酶1A(sar-1A)敲除诱导的外被蛋白Ⅱ(COP-Ⅱ)功能障碍胰岛 β 细胞内质网应激的干预效果.方法 将小鼠胰岛β细胞Min6分为空白组(Min6细胞无任何干预)、阴性对照(NC)组(Min6 细胞转染 sar-1A-NC-siRNA)及sar-1A siRNA 组(Min6 细胞转染sar-1A siRNA).收集sar-1A siRNA 转染的Min6 细胞,分为空白血清组(用含 10%大鼠空白血清的培养基培养),5%、10%、20%黄连化浊胶囊组(分别用含5%、10%、20%黄连化浊胶囊含药血清的培养基培养),以及罗格列酮组(用含10%罗格列酮含药血清的培养基培养).采用qPCR检测Min6 细胞中sar-1A miRNA的表达、免疫荧光法检测 sec31 蛋白的表达,蛋白质印迹法检测胰岛素原、磷酸化真核翻译起始因子 2α(p-eIF2α)、C/EBP 同源蛋白(CHOP)、X盒结合蛋白 1(XBP1)、肌醇需求酶1(IRE1)、X 盒(X-box)蛋白的表达.结果 空白组与NC组Min6 细胞中sar-1A mRNA、sec31蛋白及胰岛素原、p-eIF2α、CHOP、XBP1、IRE1、X-box 蛋白表达差异均无统计学意义(P均>0.05);与NC组相比,sar-1A siRNA组Min6细胞中sar-1A mRNA、sec31蛋白及胰岛素原和 X-box 蛋白表达均降低(P均<0.05),p-eIF2α、CHOP、XBP1、IRE1 蛋白表达均升高(P均<0.05).与空白血清组相比,5%、10%、20%黄连化浊胶囊组及罗格列酮组Min6 细胞中sar-1A mRNA 表达均升高(P均<0.05),5%、10%、20%黄连化浊胶囊组Min6 细胞中sar-1A mRNA表达逐渐升高,各组间差异均有统计学意义(P均<0.05).空白血清组与 5%黄连化浊胶囊组Min6 细胞中sec31 蛋白及胰岛素原、p-eIF2α、CHOP、XBP1、IRE1、X-box 蛋白表达差异均无统计学意义(P均>0.05);与5%黄连化浊胶囊组相比,10%、20%黄连化浊胶囊组及罗格列酮组 Min6细胞中sec31蛋白和胰岛素原表达均增加(P均<0.05),p-eIF2α、CHOP、XBP1、IRE1、X-box蛋白表达均降低(P均<0.05).结论 sar-1A敲除后胰岛 β 细胞存在 COP-Ⅱ功能障碍,黄连化浊胶囊能够降低sar-1A敲除后胰岛β细胞的内质网应激水平.
胰岛β细胞、黄连化浊胶囊、内质网应激、分泌及Ras相关GTP酶1A
44
R735.7;R587.1;R3
2023-10-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
1073-1080