Pak1对胚胎血管发育的作用及初步机制

摘要：

目的 研究p21活化激酶1(p21-activated kinase 1,Pak1)对胚胎血管发育的影响,并初步探讨其相关作用机制.方法 以组成激活型Pak1 (constitutively active Pak1,caPak1)的重组过表达质粒PCS2-caPak1为模板,用SP6 RNA聚合酶体外合成caPak1 mRNA,用显微注射法将其注入斑马鱼单细胞期胚胎,观察胚胎发育和表型变化,用透射电镜进一步确认胚胎血管的超微结构.用脂质体转染法将PCS2-caPak1转入人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC),用MTT法检测细胞活力,并用流式细胞术分析HUVEC凋亡情况.结果 斑马鱼胚胎发育至受精后30～36 h时,可见过表达组斑马鱼出现头部出血表型,出血比例约25％～30％,透射电镜下可见血管内皮细胞结构破坏;细胞水平过表达Pak1后,细胞变圆并出现部分脱落,MTT检测发现细胞存活减少(P＜0.01),流式细胞术分析发现内皮细胞凋亡增加(P＜0.01).结论 过表达Pak1可能通过增加内皮细胞凋亡影响胚胎血管发育.

关键词：p21活化激酶类、内皮细胞、细胞凋亡、血管发育、斑马鱼

所属期刊栏目：35

分类号：R321.56(人体形态学)

在线出版日期：2014-06-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：394-398