新西兰兔骨髓间充质干细胞-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系的构建及体外评价

摘要：

目的 构建新西兰兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系,研究BMSCs的生长和分化情况.方法 分别构建BMSCs-藻酸钙三维培养体系(W组)及BMSCs-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系(U组),在37℃、饱和湿度、5％CO2培养箱内培养,培养液为高糖DMEM(含15％胎牛血清、10 ng/mL转化生长因子β1),隔日换液,观察细胞形态变化及凝珠形态变化.第2、4、6周对凝珠进行H-E染色、甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原染色.结果 两组三维凝珠培养第10天局部有细胞团簇形成；第21天可见大量细胞团簇形成,BMSCs多保持圆球形或类球形.两组细胞增殖及生长能力差异无统计学意义(P＞0.05).培养2周,两组凝珠甲苯胺蓝染色均呈阳性,但无明显细胞外基质形成,Ⅱ型胶原抗体染色均呈弱阳性；培养4周,两组凝珠甲苯胺蓝染色均显示位于细胞团块外周的细胞呈蓝色,中央的细胞染色不明显,细胞团外周蓝色染色物质较少,中央有较多紫红色物质,Ⅱ型胶原抗体染色均呈强阳性.H-E染色、甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原抗体染色均未发现两组BMSCs的转化生长有差异,增殖数量差异也无统计学意义.结论 适量的庆大霉素局部缓释并未明显影响BMSCs的生长及转化,又可达到最小抑菌浓度；庆大霉素对BMSCs及软骨细胞超微结构的影响有待进一步探讨.

关键词：骨髓、间质干细胞、庆大霉素类、藻酸钙、细胞培养技术

所属期刊栏目：34

分类号：R329.29(人体形态学)

资助基金：上海市自然科学基金10411960400

在线出版日期：2013-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：482-487