肿瘤相关肝星状细胞促进肝癌细胞上皮间质转化和迁移

摘要：

目的 建立人肝癌组织中肿瘤相关肝星状细胞(tHSCs)分离、培养方法,探讨tHSCs对肝癌细胞生物学行为的影响.方法 采用密度梯度离心法从新鲜切除的人肝癌组织样本中分离tHSCs,锥虫蓝染色检测细胞活力,细胞免疫荧光鉴定活化tHSCs表达α-平滑肌肌动蛋白的特征,光镜观察培养的tHSCs形态学变化；tHSCs无血清培养后,收集条件培养液,分别与肝癌细胞系QGY-7701、BEL-7402、SMMC-7721共培养,并以肝星状细胞系LX-2做对照,采用MTT法、细胞划痕实验、蛋白质印迹等方法检测肝癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化(EMT)相关指标的表达.结果 从肝癌组织中分离的tHSCs活率在95％以上,纯度接近100％,在体外可进行传代培养与冻存.tHSCs能诱导3个受试肝癌细胞系产生典型的EMT样形态学变化及其分子标记物表达改变,表现为上皮标记物E-钙黏蛋白表达减少(P＜0.05),间质标记物波形蛋白表达增加(P＜0.05).与此同时,tHSCs能促进培养的3个肝癌细胞系增殖和迁移.结论 从人肝癌组织中分离的原代tHSCs活力和纯度高,可用于tHSCs的生物学功能实验研究.tHSCs在诱导肝癌细胞产生EMT样改变的同时,体外促进肝癌细胞的增殖和迁移.

关键词：肝肿瘤、肝星状细胞、上皮间质转化、细胞增殖、细胞运动

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分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家传染病重大专项基金2012ZX10002012-010;国家自然科学基金81272668,81272669

在线出版日期：2013-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：465-470