低浓度哇巴因升高豚鼠心室肌细胞内游离钙浓度可能的信号转导途径

摘要：

目的:观察哇巴因(ouabain,OUA)对豚鼠心室肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)的影响,并探讨低浓度OUA是否可通过Na+,K+-ATPase的信号转导途径升高[Ca2+]i.方法:分离豚鼠心室肌细胞,激光共聚焦显微镜术测定单个心室肌细胞[Ca2+]i的荧光密度,另用不同浓度OUA孵育急性分离的豚鼠心室肌细胞后,分别取其沉淀用Western印迹检测观察OUA对酪氨酸蛋白(Src)磷酸化的影响.结果:在正常台氏液及无钙台氏液中,OUA(10-9,10-8,10-7,10-6mol·L-1)均可浓度依赖性地升高细胞内钙浓度(P《0.05或0.01),且在正常台氏液中升高更为显著(P《0.05).蛋白酪氨酸激酶抑制剂三羟异黄酮(genistein,GST)(1、10、50、100 μmol·L-1)可浓度依赖性地抑制正常台氏液中的OUA效应.磷酸化Src包括相对分子质量120 000和70 000两个条带,各剂量OUA(10-4,10-6,10-8mol·L-1)均能使Src的两个磷酸化条带的密度较阴性对照组显著升高(P＜0.05),而GST(100 μmol·L-1)可显著抑制OUA的升高效应.结论:低浓度OUA可能通过使酪氨酸蛋白磷酸化,激活OUA/Na+,K+ATPase/Src信号转导通路,促使钙通道开放及内钙释放,从而升高豚鼠心室肌细胞内游离钙浓度.

关键词：Na+-K+-交换ATP酶、心室肌细胞、哇巴因、钙

所属期刊栏目：28

分类号：R972.1(药品)

资助基金：河北省自然科学基金301360

在线出版日期：2007-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：850-853