稳定转染维生素D受体反义cDNA的人骨肉瘤细胞系的建立

摘要：

目的：建立稳定转染维生素D受体(VDR)反义cDNA的人骨肉瘤细胞系。方法：构建VDR反义cDNA的真核表达载体，用Lipofectamine法转染人骨肉瘤细胞系HOS-8603，经G418筛选后获得稳定转染细胞株，并用免疫组化技术检测内源性VDR蛋白的表达情况；采用瞬时转染报告基因技术从靶基因水平检测VDRas3细胞内VDR的转录激活功能。结果：筛选出6株抗G418细胞克隆(VDRas1～6)，其中VDRas3细胞内源性VDR蛋白的表达量低于对照细胞。激素作用72h后，对照细胞的报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)转录活性增加约3.5倍，而VDRas3细胞CAT的转录基本不受激素诱导。结论：获得了稳定转染VDR反义cDNA的细胞系，为今后进一步研究1,25(OH)2D3及其类似物调节细胞增殖分化的分子机制提供了一个良好的细胞模型。

关键词：人骨肉瘤细胞、受体、维生素D、反义cDNA

所属期刊栏目：22

分类号：Q813.1(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金39900056

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：242-244