10.3321/j.issn:0258-879X.2000.09.016
HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库的构建
目的:为了探讨噬菌体展示技术在筛选和鉴定病毒抗原表位研究中的应用前景.方法:利用随机引物P CR法以HCV核心基因为模板合成随机DNA片段,再经特定引物二次扩增后获得高丰度的HCV核心蛋白随机DNA片段,将该片段插入噬菌粒载体pCANTAB5X的XbaⅠ位点,转化大肠杆菌TG1, 辅助噬菌体拯救,建立噬菌体随机肽展示文库.结果:所构建的随机文库含1.23×105个不同克隆,库容噬菌体滴度为2×1012 TU/ml(转导单位/ ml) ,PCR法检测插入阳性为28.1%,核酸杂交证实40%的克隆为HCV核心基因阳性克隆. 结论:所建的随机文库有足够大的库容和较好的多样性,可以满足HCV C抗原表位的筛选.
噬菌体随机展示肽库、肝炎病毒、丙型、核心蛋白
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R373.21;Q782(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金19830330;上海市科技发展基金98JC14023
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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