miR-3-5p通过VPS53介导的自噬对结直肠癌细胞增殖的影响

摘要：

目的 探讨miR-31-5p通过VPS53介导的自噬对结直肠癌细胞增殖的影响.方法 选择人正常结直肠黏膜细胞(FHC)及结直肠癌细胞株HT29、HCT116、SW480、LoVo进行研究.采用实时荧光定量PCR实验检测miR-31-5p在前述各种细胞中的表达,miR-31-5p对VPS53 RNA表达的影响,miR-31-5p、VPS53对Beclin1 RNA表达的影响.采用CCK-8法检测细胞活力.利用数据库Targetscan筛选与miR-31-5p靶向结合的靶基因,并通过双荧光素酶报告实验进行验证.利用数据库GEPIA分析VPS53和Beclin1表达的相关性.采用透射电子显微镜实验探究VPS53对细胞自噬的影响.采用蛋白免疫印迹实验(Western blot)分析VPS53对Beclin1蛋白表达的影响.结果 与FHC细胞相比,HCT116、LoVo、HT29、SW480细胞的miR-31-5p表达水平均升高(均P＜0.05).过表达miR-31-5p可促进LoVo细胞增殖(P＜0.05).miR-31-5p与VPS53靶向结合.过表达miR-31-5p可下调VPS53的RNA表达水平(P＜0.05).过表达VPS53可抑制LoVo细胞增殖,可逆转过表达miR-31-5p对LoVo细胞增殖的促进作用(均P＜0.05).结直肠癌组织中的VPS53与Beclin1的表达呈正相关.过表达VPS53促进自噬小体的形成.过表达VPS53可上调Beclin1蛋白的表达水平(P＜0.05).自噬抑制剂可逆转过表达VPS53对LoVo细胞增殖的抑制作用(P＜0.05).过表达miR-31-5p可下调Beclin1的RNA表达水平,过表达VPS53可逆转该现象(均P＜0.05).结论 miR-31-5p是结直肠癌发生发展中的重要调控因子,miR-31-5p在结直肠癌细胞中高表达.miR-31-5p可能通过下调VPS53来抑制Beclin1的表达,通过抑制自噬来促进结直肠癌细胞的增殖.

关键词：结直肠癌细胞;miR-31-5p;VPS53;Beclin1;自噬

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资助基金：南充市市校合作科研专项基金;四川省中医药管理局课题;川北医学院校级科研项目

在线出版日期：2021-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：453-459