BALB/c鼠枯否细胞的分离培养与鉴定

摘要：

目的:肝脏是肿瘤转移的好发部位,而肝脏含有丰富的免疫细胞-枯否细胞(Kupffer Cell,KC).为研究枯否细胞的抗癌活性,旨在探讨BALB/c鼠枯否细胞的分离培养方法.方法:选用健康雄性8～10周龄BALB/c鼠,麻醉无菌取肝,注射冲洗去血并剪去部分结缔组织,小玻璃瓶中剪碎肝组织,加入0.04%的EDTA和0.05%链霉蛋白酶E溶液,交替轻轻吹打消化.不锈钢筛网滤过,用0.004% Dnase Ⅰ的1640液清洗细胞液,加Tris-氯化胺溶解红细胞.30%～70%Percoll梯度离心,10%FBS贴壁培养4～6 h洗去非贴壁细胞.通过对比体内、体外枯否细胞吞噬墨水和体外吞噬聚苯乙烯乳珠(latexbeads,D1.1μm)鉴定枯否细胞.结果:Kupffer细胞的得率为(7.57±1.92)×106个/鼠肝,即6.15×106个/g,贴壁率为40.18%.用0.4%台盼蓝染色鉴定,细胞存活率在95%以上,吞噬鉴定发现Kupffer细胞的纯度可达90%.贴壁Kupffer细胞的形态多样,可见不规则,多边形,多角伪足,典型的星形及多角形.体外培养枯否细胞存活2周后未见再有吞噬功能.结论:酶消化法结合梯度离心和贴壁培养是分离BALB/c鼠枯否细胞的可靠方法,为进一步实验打下了基础.

关键词：枯否细胞(Kupffer Cell)、分离、鉴定、BALB/c鼠

所属期刊栏目：9

分类号：R392.12;R446.63

在线出版日期：2003-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：88-92