壳聚糖/β-甘油磷酸钠/胶原水凝胶包裹IR-780碘化物标记肌腱干细胞的体内示踪研究

摘要：

目的 探讨肌腱干细胞(TSCs)用IR-780碘化物标记之后的生物学特性以及壳聚糖(C)/β-甘油磷酸钠(GP)/胶原(Co)水凝胶包裹IR-780碘化物标记TSCs的体内示踪情况.方法 14只雄性SD大鼠(4周龄,体重约100g),2只用于提取大鼠TSCs,4只用于活体成像观察,8只用于组织学分析.用酶消化法提取大鼠跟腱来源TSCs,用IR-780碘化物标记TSCs,激光共聚焦显微镜下观察IR-780碘化物标记TSCs的细胞内定位,用流式细胞术检测其标记阳性率及对TSCs细胞周期的影响,用CCK-8法检测IR-780碘化物标记TSCs对其增殖的影响,用C/GP/Co水凝胶包裹IR-780碘化物标记的TSCs移植至大鼠跟腱损伤部位.通过全身近红外成像及组织学观察,检测TSCs在大鼠体内的存活及分布情况.结果 成功提取大鼠跟腱来源TSCs,并成功制作C/GP/Co水凝胶.IR-780碘化物可成功标记TSCs,其标记阳性率为95.75％,荧光强度显著高于对照组,且对TSCs的细胞周期及增殖无明显不良影响.通过全身近红外成像及组织学观察,很容易检测到大鼠跟腱损伤区域IR-780碘化物标记的TSCs,荧光信号在大鼠身体其他部位几乎检测不到.从1～28d,IR-780碘化物的荧光信号逐渐减弱,但28d时仍能检测到明显荧光.结论 IR-780碘化物可有效标记TSCs,其标记阳性率为95.75％,且对TSCs的细胞周期及增殖无明显不良影响;IR-780碘化物标记的TSCs即使在28d时也有明显可检测的荧光;TSCs包裹在C/GP/Co水凝胶内移植至大鼠跟腱损伤部位,至少存活了4周.C/GP/Co水凝胶包裹TSCs可用于大鼠跟腱损伤的体内实验研究.

关键词：肌腱损伤;肌腱干细胞;肌腱组织工程;IR-780碘化物;示踪技术

所属期刊栏目：23

分类号：R685(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：国家自然科学基金重点项目81230040

在线出版日期：2021-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：781-787