人β防御素2腺病毒表达载体的构建及其在大鼠真皮多能干细胞中的表达

摘要：

目的构建和鉴定人β防御素2(HBD2)的重组腺病毒表达载体,并观察其转染大鼠真皮多能干细胞(dMSCs)后的表达.方法反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HBD2全长cDNA,亚克隆至穿梭质粒(pAdTrack-CMV)中,然后转化含骨架质粒(pAdEasy-1)的大肠杆菌BJ5183,通过同源重组产生腺病毒载体质粒.PacⅠ酶切阳性的重组质粒后转染293细胞,包装出重组病毒载体.用所得重组腺病毒感染dMSCs细胞,并采用RT-PCR和荧光免疫组织化学检测其在dMSCs中的表达情况.结果经测序、酶切及聚合酶链反应(PCR)鉴定,表明已成功地扩增到HBD2全长cDNA,并将其顺序克隆到穿梭质粒和骨架质粒中,进而组装出腺病毒表达载体.经RT-PCR和免疫组织化学证实构建的病毒载体可感染dMSCs,并有效表达HBD2.结论本实验成功地构建了含HBD2基因的腺病毒表达载体,并证实其可在dMSCs中表达.

关键词：人β防御素2、腺病毒载体、真皮多能干细胞

所属期刊栏目：8

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：科技部科研项目2005CB522605;中国科学院资助项目30300185

在线出版日期：2006-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：69-72