IL-35表达对小鼠脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群分化的影响

摘要：

目的 构建小鼠白细胞介素(IL)-35 基因表达质粒,探讨IL-35 表达对小鼠脾脏中CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群分化的影响.方法 采用PCR法扩增获得小鼠 IL-35 基因全长片段,将该片段连入鼠干细胞病毒载体(pMSCV-GFP)多克隆位点区,获得携带 IL-35 基因的质粒载体 pMSCV-IL-35-GFP.将 9 只雄性C57BL/6J 小鼠分为 3 组:PBS组、pMSCV组和 pMSCV-IL-35 组,分别向 3 组小鼠尾静脉注射 PBS、pMSCV-GFP空载质粒和pMSCV-IL-35-GFP质粒.72 h后分离小鼠脾脏,采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测IL-35 亚基 EB 病毒诱导基因 3(Ebi3)和 IL-12a mRNA 相对表达水平;采用流式细胞术检测 CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群百分比,并进一步检测CD8+T淋巴细胞免疫功能分子颗粒酶B(Gzmb)和调节性T淋巴细胞(Tregs)细胞特异转录因子叉头/翅膀状螺旋转录因子 3(Foxp3)mRNA相对表达水平.结果 RT-qPCR结果显示,与PBS组或pMSCV组比较,pMSCV-IL-35 组小鼠脾脏 Ebi3、IL-12a mRNA 相对表达水平均明显升高(P<0.001);流式细胞检测结果显示,与PBS组或 pMSCV组比较,pMSCV-IL-35 组小鼠脾脏 CD8+T 淋巴细胞百分比明显降低(P<0.001),而 CD4+CD25+Tregs 百分比明显升高(P<0.001),并且 Gzmb mRNA相对表达水平明显降低(P<0.01),Foxp3 mRNA相对表达水平明显升高(P<0.01).结论 IL-35 可以抑制效应性T淋巴细胞的活性,促进Tregs亚群分化发挥免疫调节作用,这将为 IL-35 基因应用于体内免疫治疗提供理论依据.

关键词：白细胞介素35、调节性T细胞、细胞分化、免疫调节

所属期刊栏目：52

分类号：R392

资助基金：山东省医药卫生科技发展计划项目;山东省中医药科技项目;山东第一医科大学山东省医学科学院青年科学基金培育资助计划项目

在线出版日期：2023-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2115-2120